Titolo: Techniques in Quantification and Localization of Gene Expression [Hardcover] Patterson, Bruce K.
Editore: Birkh�user
Data di pubblicazione: 2000
Lingua: Inglese
ISBN 10: 0817640347
ISBN 13: 9780817640347
Rilegatura: Rilegato
Condizione: Very Good

Descrizione articolo

Riassunto

The molecular basis of disease is the driving force in biomedical research. Gene detection, quantification, and localization are required to determine disease pathogenesis. In as much as DNA is the genetic potential in a particular organism, RNA and protein expression are the functional result of this genetic programme. This book describes methods to quantify and localize gene expression, with a particular emphasis on the sensitive detection of low abundance gene expression. Sensitive detection of gene expression has been hindered by poor recovery or preservation of target sequences. The text describes optimized methods to ensure full recovery and preservation of targets from specimen acquisition through detection of specific targets and final analysis. This text also focuses upon in situ analysis of cells and tissues

Contenuti

Basic Methods.- 1. Basic Flow Cytometry Instrumentation.- Instrumentation.- Overview.- Delivery of Sample.- Light Source and Signal Detection.- Data Analysis.- Gating.- Color Compensation.- Conclusion.- 2. Fixation for In Situ Molecular Analysis.- Types of Fixatives.- Cells.- Tissue.- 3. A Method for Reduction of Green Wavelength Autofluorescence Emission in Cellular Preparations.- Protocols―Flow Cytometry.- Trypan Blue with Surface Staining.- Surface Stain Plus In Situ Hybridization.- Surface Label Plus In Situ PCR or RT-PCR.- 4. Gene Quantification: Choosing the Target.- Fresh Cells and Tissue.- Quantification of Gene Expression Prior to In Situ Analysis.- 5. Detection and Quantification of Cytokine-Producing Cells by Immunostaining.- Materials.- Methods.- Procedure 1: Cytokine Detection of Individual Cells Smeared on Slides Using Immunostaining.- Quantification of Individual Cytokine-Producing Cells by Automated Computerized Image Analysis (ACIA).- Assessment of Cell Size, Intensity of Signal, and Enumeration of Individual Cytokine-Producing Cells.- Procedure 2: Immunofluorescent Staining of Cytokine-Producing Cells in Suspension.- Procedure 3. Cytokine Detection in Tissue Using Immunohistochemistry.- Troubleshooting.- 6. In Situ Hybridization Using the bDNA Technology.- Materials and Methods.- Reagents.- Preparation of Cytospin Slides.- Pretreatment of Slides Prior to Hybridization.- Hybridization and Signal Development.- Results and Discussion.- Conclusions.- Acknowledgments.- Specific Applications.- 7. Kaposi’s Sarcoma―Associated Human Herpes Virus Eight: Localization of Viral Gene Expression and Viral Latency.- Materials and Methods.- Clinical Samples.- Solution-Based PCR and Serologic Assays.- In Situ Hybridization.- In Situ Polymerase Chain Reaction.- Results.- Discussion.- 8. Pathogenetic Mechanisms of Animal Orbiviruses That Cause Disease at Low Copy Number.- Materials and Methods.- Experimental Design.- Clinical Samples.- Virus Isolation.- Immunochemistry.- Nested Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction.- In Situ Hybridization.- Reverse Transcription In Situ Polymerase Chain Reaction.- Results.- Clinicopathologic Features.- Isolation and Typing of Viruses.- Tissue Distribution and Cellular Localization of Viral Proteins and Nucleic Acids.- Discussion.- 9. Localization of Hepatitis C Virus Using Reverse Transcriptase Fluorescence In Situ 5’ Nuclease Assay.- Determining the Localization Method.- Detection of Gene Expression in Specific Cell Types.- 10. Simultaneous Quantification and Localization of HIV gag-pol Expression Using Ultrasensitive Fluorescence In Situ Hybridization.- 11. Quantification and Localization of Gene Expression: Future Directions.

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Se sei un consumatore, puoi esercitare il tuo diritto di recesso seguendo le istruzioni riportate di seguito. Per "consumatore" si intende qualsiasi persona fisica che agisca per fini che non rientrano nel quadro della sua attivit� commerciale, industriale, artigianale o professionale.

Informazioni relative al diritto di recesso

Diritto di recesso

Hai il diritto di recedere dal presente contratto entro 14 giorni per qualsiasi motivo.

Il periodo di recesso scade dopo 14 giorni dal giorno in cui

tu acquisisci, o un terzo designato diverso dal vettore e da te acquisisce, il possesso fisico dell'ultimo bene o l'ultimo lotto o pezzo.

Per esercitare il diritto di recesso, sei tenuto a informare Hay-on-Wye Booksellers, 14 High Town, HR35AE, Hay-on-Wye, HEREF, United Kingdom, della tua decisione di recedere dal presente contratto tramite una dichiarazione esplicita (ad esempio lettera inviata per posta, fax o posta elettronica). A tal fine puoi utilizzare il modulo tipo di recesso, ma non e' obbligatorio. Puoi anche compilare e inviare elettronicamente il modulo tipo di recesso o qualsiasi altra esplicita dichiarazione sul nostro sito web, dalla sezione "Ordini" nel "Mio Account". Nel caso scegliessi questa opzione, ti trasmetteremo senza indugio una conferma di ricevimento su un supporto durevole (ad esempio per posta elettronica).

Per rispettare il termine di recesso, � sufficiente inviare la comunicazione relativa all'esercizio del diritto di recesso prima della scadenza del periodo di recesso.

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Se recedi dal presente contratto, ti saranno rimborsati tutti i pagamenti che hai effettuato a nostro favore, compresi i costi di consegna (ad eccezione dei costi supplementari derivanti dalla tua eventuale scelta di un tipo di consegna diverso dal tipo meno costoso di consegna standard da noi offerto). Potremo trattenere dal rimborso le somme derivanti da una diminuzione del valore del prodotto risultante da una tua non necessaria manipolazione.

I rimborsi verranno effettuati senza indebito ritardo e in ogni caso non oltre 14 giorni dal giorno in cui siamo stati informati della tua decisione di recedere dal presente contratto.

Detti rimborsi saranno effettuati utilizzando lo stesso mezzo di pagamento da te usato per la transazione iniziale, salvo che tu non abbia espressamente convenuto altrimenti; in ogni caso, non dovrai sostenere alcun costo quale conseguenza di tale rimborso. Il rimborso pu� essere sospeso fino al ricevimento dei beni oppure fino all'avvenuta dimostrazione da parte tua di aver rispedito i beni, se precedente.

Ti preghiamo di rispedire i beni o di consegnarli a Hay-on-Wye Booksellers, Hereford, HERE, United Kingdom, senza indebiti ritardi e in ogni caso entro 14 giorni dal giorno in cui hai comunicato il tuo recesso dal presente contratto. Il termine � rispettato se rispedisci i beni prima della scadenza del periodo di 14 giorni. I costi diretti della restituzione dei beni saranno a tuo carico. Sei responsabile solo della diminuzione del valore dei beni risultante da una manipolazione del bene diversa da quella necessaria per stabilire la natura, le caratteristiche e il funzionamento dei beni.

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Il diritto di recesso non si applica in caso di:

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fornitura di contenuto digitale (inclusi applicazioni, MP3, ecc.) mediante un supporto non materiale (per esempio un CD o un DVD) se al momento dell'inoltro dell'ordine hai espressamente consentito all'inizio dell'esecuzione accettando la perdita del diritto di recesso in conseguenza dell'inizio di esecuzione.

Modulo di recesso tipo

(Compilare e restituire il presente modulo solo se si desidera recedere dal contratto)

Destinatario: (Hay-on-Wye Booksellers, 14 High Town, HR35AE, Hay-on-Wye, HEREF, United Kingdom)

Con la presente io/noi (*) notifichiamo il recesso dal mio/nostro (*) contratto di vendita dei seguenti beni/servizi (*)

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